貝克曼紅細(xì)胞裂解液中的裂解法包括化學(xué)裂解、酶裂解和機(jī)械裂解.化學(xué)裂解和酶裂解通常是比較溫和的方法,通常會很少使DNA斷裂?;瘜W(xué)裂解和酶裂解法主要是裂解液處理法,主要根據(jù)不同的目的,裂解液的組成有所不同,主要有提取核酸和蛋白兩中,在提取RNA或DNA時,我們主要是要充分裂解細(xì)胞,得到更多的核酸;如果我們的目的是蛋白,那要根據(jù)蛋白的位置、特性等因素考慮裂解液。
貝克曼紅細(xì)胞裂解液法分離純化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,有以下優(yōu)點(diǎn):
1、經(jīng)紅細(xì)胞裂解液處理后的骨髓液內(nèi)含有大量各種促進(jìn)細(xì)胞生長的因子。紅細(xì)胞及血小板的胞漿內(nèi)含有豐富的促細(xì)胞生長因子,這些細(xì)胞因子可促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成集落的簇狀生長,為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生長提供更適應(yīng)的微環(huán)境,以利于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖。
2、增加骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的濃度,提高骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖速度。經(jīng)紅細(xì)胞裂解液處理后,骨髓液內(nèi)細(xì)胞雜質(zhì)明顯減少,通過離心純化,可以得到純度更高的含有骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的骨髓液,進(jìn)而可以明顯較少骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)時間,提高骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖速度。
3、早期促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的貼壁。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)經(jīng)紅細(xì)胞裂解液處理后,早期骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的貼壁細(xì)胞數(shù)量明顯較未經(jīng)紅細(xì)胞裂解液處理所獲得的數(shù)量多??赡艿脑?yàn)榻?jīng)紅細(xì)胞裂解液處理后骨髓液內(nèi)紅細(xì)胞及血小板數(shù)量極少,影響骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞貼壁的雜質(zhì)相對減少,為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞貼壁保留出更多的空間,利于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的早期貼壁。