貝克曼流式細胞儀鞘液是對細胞進行自動分析和分選的裝置,主要用于形成鞘流,利于分析儀器進行細胞計數(shù)、分類。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據(jù)預選的參量范圍把一定的細胞亞群從中分選出來。多數(shù)流式細胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個細胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標,而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說,它的細節(jié)分辨率為零。
流式細胞儀是通過流體聚焦的原理來讓細胞逐一排隊通過激光監(jiān)測點的。這個就需要使用到所謂的鞘液。在流式細胞儀中,鞘液和樣本都被加壓,快速通過。但是鞘液的流速較快,而樣本液的壓力要稍高。鞘液環(huán)繞在樣本液的周圍,由于流速很快,而且是軸流形式,所以鞘液和樣本并不混合。這也就是為什么可以用水來代替鞘液的原因所在。
貝克曼流式細胞儀鞘液可同時進行多參數(shù)測量,信息主要來自特異性熒光信號及非熒光散射信號。測量是在測量區(qū)進行的,所謂測量區(qū)就是照射激光束和噴出噴孔的液流束垂直相交點。液流中央的單個細胞通過測量區(qū)時,受到激光照射會向立體角為2π的整個空間散射光線,散射光的波長和入射光的波長相同。散射光的強度及其空間分布與細胞的大小、形態(tài)、質(zhì)膜和細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)密切相關(guān),因為這些生物學參數(shù)又和細胞對光線的反射、折射等光學特性有關(guān)。
未遭受任何損壞的細胞對光線都具有特征性的散射,因此可利用不同的散射光信號對不經(jīng)染色活細胞進行分析和分選。經(jīng)過固定的和染色處理的細胞由于光學性質(zhì)的改變,其散射光信號當然不同于活細胞。散射光不僅與作為散射中心的細胞的參數(shù)相關(guān),還跟散射角、及收集散射光線的立體角等非生物因素有關(guān)。